【新品上线】土壤基因DNA提取试剂盒

壤基因组DNA提取试剂盒

（离心柱型）

目录号  DH114

保存条件  室温（15-25℃）

产品内容

产品简介

     本试剂盒适用于从土壤中提取基因组DNA。结合先进的硅基质膜技术，能够专一的结合DNA，并最大限度去除土壤微生物中杂蛋白及其他有机物。本产品无需乙醇沉淀，1小时内即可完成总DNA 的提取，具有高效、快速、方便之特点。

自备试剂

     溶菌酶，无水乙醇。

注意事项

1. 从新鲜采取的土样中所提取得DNA产率更高。

2. 第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在漂洗液PW中加入相应的无水乙醇。

3. 若下游实验对RNA污染较敏感，可在70℃水浴孵育后加入10 μl浓度为10 mg/ml 的RNase A溶液，  RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购。

操作步骤

1.     取约250 mg土样，加入250 mg玻璃珠和1 ml缓冲液LQ，震荡混匀1 min。

2.      12000 rpm离心2 min，弃上清。

3.      沉淀中加入500 ul裂解液LT和100 ul 溶菌酶（10 mg/ml），涡旋振荡10 min。

4. 将离心管置于70℃水浴10分钟，其间颠倒离心管混匀样品数次。

        注：如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入10 μl浓度为10 mg/ml 的RNase A溶液，震荡  

       混匀，室温放置几分钟。

5. 加入2倍体积的结合液LN，充分混匀。

6. 柱平衡：向吸附柱C1中加入500 μl平衡液LB，12,000 rpm 离心 1 min，弃收集管中滤液，将吸附柱放入收集管中。

7. 将混匀的液体转入吸附柱C1中，12,000 rpm离心30 秒，弃掉废液。

        注：吸附柱容积约为800 µl左右，可分次加入离心。

8. 向吸附柱C1中加入600 µl漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心30 秒，倒掉废液，将吸附柱C1放入收集管中。

9. 重复操作步骤8。

10. 空柱 12,000 rpm离心 2 min。室温放置 5-10 min，除去残留乙醇。

        注：漂洗液中的乙醇会影响后续酶促反映，此处应尽量晾干残留的漂洗液。

11. 将吸附柱放入一个干净的离心管中， 在吸附膜的中间部位滴加 50-100μl 洗脱缓EB，室温放置 1 分钟，12,000 rpm 离心 2 min洗脱 DNA，可立即用于下游分子生物学实验或-20℃保存。

        注：将洗脱得到的溶液重新加入吸附柱中，重复步骤10可增加DNA得率。若后续实验对pH、

        EDTA敏感，需使用ddH₂O做洗脱液。